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人蛋白ELISA检测试剂盒

收藏 2020-11-23

人蛋白ELISA检测试剂盒 

人蛋白ELISA检测试剂盒检测中样品的处理

1.细胞培养物上清:细胞培养物于室温1000g,离心10分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。

2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

4.尿液:无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要长期保存尿样,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。

5.组织匀浆:将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。注:取样和样品处理过程中,防止有毒物质对操作人员的危害,要采取相应的保护措施。

elisa酶联免疫试剂盒(间接法)

(1) 抗原包被:用包被液将PEDV抗原作1∶5稀释包被反应板,每孔100μl,同时设阴性细胞培养物对照孔,置4℃过夜。

(2) 洗涤:用洗涤液洗涤2次,每次2min,沥干。

(3) 加入被检血清:用保温液将被检血清作1∶100稀释,加入反应板相邻的两个孔中,每孔100μl。同时作阴、阳性标准血清对照,置37℃孵育1h。

(4) 洗涤3次:方法同上。

(5) 加入酶结合物:用保温液将酶结合物作1∶4 000稀释,加入反应孔中,每孔100μl,置37℃孵育1h。

(6) 洗涤3次:方法同上。

(7) 加入底物:每孔100μl,置室温暗盒内显色20min。

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